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实验室常用的灭菌方法可分为物理方法和化学方法两大类,包括干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法、消毒剂灭菌法、抗生素灭菌法等,玻璃器皿的灭菌方法一般是物理方法,常用的是干热灭菌法和湿热灭菌法两种:
1、干热灭菌
利用恒温干燥箱内120ºC-150ºC的高热,持续90-120分钟,从而杀死细菌和芽孢,用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。除了恒温干燥箱外,酒精灯火焰烧灼灭菌法也属于干热灭菌法的一种,在实验过程中有时会用酒精灯火焰对玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2、湿热灭菌
又称高压蒸汽灭菌法,是用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固、变性而使微生物死亡,一般在高压蒸汽灭菌器内进行,蒸汽压力调整为1.0-1.1kg/cm²,维持20-30分钟即可杀灭细菌。除了高压蒸汽灭菌器,湿热灭菌法还有煮沸灭菌法、巴氏消毒法、流通蒸汽灭菌法及间歇蒸汽灭菌法。
. 在玻璃器皿上贴上小正方形的无菌指示胶带(这与高压灭菌器中的无菌指示胶带不同 ,因为烤箱中的温度更高。大多数高压灭菌器中的无菌指示胶带会烤焦,黏合剂中的易爆炸成分就会残留在烤箱和玻璃器皿中。)或其他的指示标签,并写上日期
2. 将玻璃器皿放人烤箱(在有风扇的情况下温度可以达到160°C ,宜使用可记录温度计和易弯曲的探针)中,烤箱应有可循环空气的风扇,并将温度设定在 160°C 。
3. 确保烤箱的中央温度达到160°C:
(a) 将一个无菌指示器(Alpha Medical 适用于干热或蒸汽消毒,Thermalog 指示器只适用于蒸汽消毒)放人瓶中或其他器皿内,置于烤箱中央。
(b) 如果用可记录的麵计,将感应部分放入瓶中或其他器皿内,符于烤箱中央
玻璃棒既可以用高压蒸汽灭菌,又可以用干烤法灭菌。
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